介紹幾種二抗探針的優缺點及其適用的實驗

日期：2022-07-31 03:28

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摘要：介紹幾種二抗探針的優缺點及其適用的實驗：酶：主要有兩種不同的酶耦聯物，HRP和AP。比較而言，前者更經濟、快速、穩定，而后者較前者更為靈敏，通常情況下，HRP廣泛應用于免yi 組化，western blot和ELISA中，而堿性磷酸酶（AP）更適合于固相的免yi 檢測實驗，如ELISA和western blot. 熒光基團： FITC：FITC是廣泛使用的熒光基團，但其*大的缺點是淬滅快，使用抗淬滅劑可以減輕。 AMCA：常用在多標記實驗中，如免yi 熒光、流式細胞術。其缺點是，淬滅快，且由于肉眼不能很好的檢測...

介紹幾種二抗探針的優缺點及其適用的實驗：

酶：

主要有兩種不同的酶耦聯物，HRP和AP。比較而言，前者更經濟、快速、穩定，而后者較前者更為靈敏，通常情況下，HRP廣泛應用于免yi 組化，western blot和ELISA中，而堿性磷酸酶（AP）更適合于固相的免yi 檢測實驗，如ELISA和western blot.

熒光基團：

FITC：FITC是廣泛使用的熒光基團，但其*大的缺點是淬滅快，使用抗淬滅劑可以減輕。

AMCA：常用在多標記實驗中，如免yi 熒光、流式細胞術。其缺點是，淬滅快，且由于肉眼不能很好的檢測其所激發的藍色熒光，因而AMCA耦聯的二抗更適用于檢測大量存在的抗原。

花青染料（Cy2,Cy3,Cy5）：Cy2比FITC更穩定，且在表面熒光顯微鏡下，Cy2的熒光FITC更強。Cy3和Cy5比大多數熒光基團更亮，更穩定，背景更弱。二者常在共聚焦顯微實驗中作多標記。但Cy5的缺點是不能用表面熒光顯微鏡觀察，因此通常用具有遠紅外檢測器的共聚焦顯微鏡觀察。

TRITC,RRX,TR：TRITC經常和FITC一起用于雙標記實驗中，也可以使用RRX或TR，但TR會產生較高的背景。在使用裝有氪氫燈的激光共聚焦掃描顯微鏡作三標記實驗時，RRX尤其有用，可以和Cy2（或FITC）及Cy5一起使用，因為RRX的發射波長在Cy2和Cy5中間，且和這兩者的重疊很少。

PE：常和FITC一起用于流式細胞術雙標記實驗。